Asco_00100 : CDS information

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Organism
StrainATCC 14891 (=NBRC 13981)
Entry nameAscomycin
Contig
Start / Stop / Direction11,248 / 10,988 / - [in whole cluster]
11,248 / 10,988 / - [in contig]
Locationcomplement(10988..11248) [in whole cluster]
complement(10988..11248) [in contig]
TypeCDS
Length261 bp (86 aa)
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Category2.1 modification addition of extender units
Productputative acyl carrier protein
Product (GenBank)FkbJ
Gene
Gene (GenBank)fkbJ
EC number
Keyword
  • methoxymalonyl-ACP
Note
Note (GenBank)
  • ACP
Reference
ACC
PmId
[10863099] The FK520 gene cluster of Streptomyces hygroscopicus var. ascomyceticus (ATCC 14891) contains genes for biosynthesis of unusual polyketide extender units. (Gene. , 2000)
[15179529] Engineered biosynthesis of 16-membered macrolides that require methoxymalonyl-ACP precursors in Streptomyces fradiae. (Appl Microbiol Biotechnol. , 2004)
comment
[PMID:10863099](2000)
FK520 gene clusterの報告。
fkbJ: acyl carrier protein

fkbGHIJKはextender unit methoxymalonyl-ACPの合成に関与すると相同性から提唱している。

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[PMID:15179529](2004)
S.hygroscopicus由来fkbG-Kを導入することにより、S. fradiaeはmalonyl-CoA, methylmalonyl-CoA, ethylmalonyl-CoAに加えてmethoxymalonyl-ACPもPKS前駆体として利用できるようになることを、midecamycin PKS genes(最後から2番目の縮合ステップでmethoxymalonateを要求)の異種性発現産物で確認している。
Related Reference
ACC
Q8KUG2
NITE
Ansam_00160
PmId
[11960423] Identification of a set of genes involved in the formation of the substrate for the incorporation of the unusual "glycolate" chain extension unit in ansamitocin biosynthesis. (J Am Chem Soc. , 2002)
[11996558] Functional expression of genes involved in the biosynthesis of the novel polyketide chain extension unit, methoxymalonyl-acyl carrier protein, and engineered biosynthesis of 2-desmethyl-2-methoxy-6-deoxyerythronolide B. (J Am Chem Soc. , 2002)
comment
2nd(Q8KUG2) 63%, 2e-21
Actinosynnema pretiosum subsp. auranticum_asm14
Acyl carrier protein

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[PMID:11960423](2002)
CoAの代わりにSNACを使い13C-labelした2-hydroxymalonyl-SNAC or 2-methoxymalonyl-SNACを用いて取り込みを測定。側鎖前駆体isobutyrateと共にA. pretiostmz ATCC 31565に与えたが、ansamitocin P-3での同位体濃縮はなかった。したがって珍しいunitによる3つめの鎖伸長stepは、2-hydroxymalonyl-CoA or 2-methoxymalonyl-CoAを基質として使用しない。

珍しい伸長unitの合成に関連しそうなsubclusterにはACPであると予測されるORFが含まれた。これをコードするasm14を不活化するとansamitocin産生や新規化合物蓄積ができなかった。

よって鎖伸長反応の基質は、おそらく2-hydroxy- or 2-methoxymalonyl-ACPである。

また、asm15 mutantでは珍しい伸長unitの代わりにmalonate unitを取り込んだ10-desmethoxy-ansamitocin P-3が見られた。asm14 mutantではこの化合物が検出されなかったので、asm14によってコードされるACPはmalonateの異常な取り込みにも必要である。これは機能的に能力のある立体構造でPKSを維持するため、またはPKSのAT3にmalonateを実際に運搬するためと考えられる。

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[PMID:11996558](2002) abstract
S. lividansで、AT domainsのひとつがmethoxymalonateに特異的なATで置換されているerythromycin PKSのカセットとasm13-17を同時発現すると、予測された位置にmethoxymalonateが取り込まれた6-deoxyerythronolide Bの派生体が産生された。よって、asm13-17はmethoxymalonyl-ACP生合成に十分である。

また、methyltransferaseをコードするasm17を削除すると、そのhydroxy類似体ではなく6-deoxyerythronolide Bが得られたので、伸長unitのmethylationはその取り込みのために必要である。
ACC
Q9XBU6
PmId
[16983083] Hydroxymalonyl-acyl carrier protein (ACP) and aminomalonyl-ACP are two additional type I polyketide synthase extender units. (Proc Natl Acad Sci U S A. , 2006)
comment
28th(Q9XBU6) 33%, 6e-05
Bacillus cereus_zmaD
ZmaD

hydroxymalonyl-ACP and aminomalonyl-ACPの生合成が割り当てられているgenesをE.coli発現、精製してin vitroでの再構成ができるか確認している。
ZmaDはapo型ACPで、hydroxymalonyl-ACP形成に関与する。

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selected fasta
>putative acyl carrier protein [FkbJ]
MTAPVKDDPVAHALVAFLKTKTRSDWPVDRDLFAEGGLTSLFAMELVVYLEKTFDVTIAG
PDLQLANFRTVESMVALVHRLRAVDA
selected fasta
>putative acyl carrier protein [FkbJ]
ATGACCGCACCCGTCAAGGACGACCCCGTCGCGCACGCGTTGGTCGCGTTCCTCAAGACG
AAGACCAGGTCGGACTGGCCCGTGGACCGCGACCTGTTCGCGGAGGGCGGCCTCACGTCG
CTGTTCGCGATGGAACTGGTCGTGTACCTGGAGAAGACGTTCGACGTCACGATCGCCGGC
CCGGACCTCCAGCTCGCGAACTTCCGTACCGTCGAGTCCATGGTCGCACTCGTCCACCGG
CTGCGGGCCGTCGATGCCTGA

close this sectionFeature

BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR003231 Acyl carrier protein (ACP) (Family)
 [37-80]  PD000887
PD000887   PD000887
IPR009081 Acyl carrier protein-like (Domain)
 [11-80]  2.5e-13 G3DSA:1.10.1200.10
G3DSA:1.10.1200.10   ACP_like
 [19-78]  1.2e-07 PF00550
PF00550   PP-binding
 [2-82]  4.60000044330862e-12 SSF47336
SSF47336   ACP_like
 [6-79]  PS50075
PS50075   ACP_DOMAIN
SignalP
 [1-24]  0.115 Signal
Eukaryota   
TMHMM No significant hit
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