Fren_00110 : CDS information

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Organism
StrainAK24158
Entry nameFrenolicin
Contig
Start / Stop / Direction14,136 / 13,081 / - [in whole cluster]
14,136 / 13,081 / - [in contig]
Locationcomplement(13081..14136) [in whole cluster]
complement(13081..14136) [in contig]
TypeCDS
Length1,056 bp (351 aa)
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Category1.4 Other
Productputative acyl-ACP thioesterase
Product (GenBank)putative acyltransferase for starter unit
Gene
Gene (GenBank)frnK
EC number
Keyword
  • type II thioesterase
  • non-acetate starter unit
Note
Note (GenBank)
  • FrnK; Streptomyces peucetius DpsD homolog
Reference
ACC
comment
"Analysis of a 27 kb region of Streptomyces roseofulvus containing genes for frenolicin biosynthesis."

論文として報告があるのは10.2kbp領域のみ[PMID:8181754]。
このORFはその範囲外でGenBank登録AF058302に由来する。
Related Reference
ACC
Q9KHK3
NITE
Enter_00120
PmId
[21531566] Policing starter unit selection of the enterocin type II polyketide synthase by the type II thioesterase EncL. (Bioorg Med Chem. , 2011)
comment
Blast 8th, id44%, 1e-51
Streptomyces maritimus_encL
Putative acyl transferase EncL

encL mutantはwildと類似したレベルのenterocinを産生。
encABCNDを含んだplasmidを異種性発現すると、benzoate-primed polyketides wailupemycinsを産生。

8His-tagged EncLをE.coliで産生してin vitro実験に使用。
EncABC + malonyl-CoA でuncharacterized acetate primed polyketidesが産生されるが、この反応にEncLを加えるとこれらの産物が減る。
EncABCN + benzoyl-CoA, malonyl-CoA でbenzoate-primed wailupemycinsが産生されるが、この反応にEncLを加えるとこれらの産物が増える。

acetyl- and benzoyl-EncC に EncLを加えたときのholo-EncC, acetyl-EncC, and benzoyl-EncCの量をタイムコースで定量。
acetyl-EncCはEncLを加えて30秒後に枯渇。これに対応するholo-EncC増加あり。
benzoyl-EncCは相対的にゆっくり加水分解された。

これらの結果からEncLは、misprimed acetyl-ACP(EncC)を加水分解してEncCに戻すことにより正しいstarter unit benzoyl-ACP(EncC)が取り込まれ、enterocin合成が進むようにすると提唱。
ACC
Q9F6D9
NITE
R1128_00030
PmId
[15260498] The acyltransferase homologue from the initiation module of the R1128 polyketide synthase is an acyl-ACP thioesterase that edits acetyl primer units. (Biochemistry. , 2004)
comment
Blast 18th, id47%, 4e-46
Streptomyces sp. R1128_zhuC
Acyl transferase

tcm minimal PKS genesとの発現でZhuCの役割を確認。
tcm minimal PKSは非acetateなacyl基で直接primeされることができる。
ZhuCがあるとacetate-primed decaketides合成がなくなり、hexanoyl-primed octaketides合成のみになる。
ZhuCは、hexanoyl- and octanoyl-ACPより100倍よい特異性をacetyl- and propionyl-ACPに持つ。
ZhuCはacyl-ZhuG から holo-ZhuNへのtransacylationを触媒するが、そのacyl移動率はin vivoで生理学的に関連するためには遅すぎる。

よってZhuCはacetyl-ACP thioesteraseとして働き、PKS伸長moduleをprimeするalkylacyl-ZhuGと競合するacetate primer unitsを一掃する。

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selected fasta
>putative acyl-ACP thioesterase [putative acyltransferase for starter unit]
MRSEGGTEEEGAPVVALLLPGQGAQRARMAAGLHGVVPEFTTAVEECFAVWGTWGEELRA
RWLDGAGGEEALERAAVAQPLLFAVGYGLGRALGAGAQGAPHLLLGHSVGELAAAALAGV
CAPGAALRLLAERDAVLRAAPSGGMLAVAAPVDDLRPYVGADVVVGAVNGPRQTVLCGPE
APLRAVARRLADDGLTARRLQADVPFHSPALAGAARRLTRASAERVARWRPPAVPLWSGR
TGRALTPGEAVRAAFWCGQLAAPVLYWPALGNLLATATATATTTGGGRGVVLLDASPDGS
LGAPARRHPAVRSGAARVVRLLPARPGDPADDVRAFRAALQQAGQVVRDGG
selected fasta
>putative acyl-ACP thioesterase [putative acyltransferase for starter unit]
GTGCGGAGCGAGGGCGGTACGGAGGAGGAGGGCGCCCCGGTGGTGGCCCTGCTGCTGCCC
GGTCAGGGCGCGCAGCGGGCCCGGATGGCGGCCGGACTCCACGGCGTGGTGCCGGAGTTC
ACGACCGCGGTGGAGGAGTGCTTCGCCGTGTGGGGCACCTGGGGGGAGGAGTTGCGCGCG
CGGTGGCTGGACGGGGCGGGCGGCGAGGAGGCGCTGGAACGGGCCGCTGTCGCGCAGCCG
TTGCTCTTCGCCGTGGGGTACGGGCTCGGGCGGGCGCTCGGCGCGGGGGCGCAGGGTGCG
CCGCACCTGTTGCTCGGGCACAGCGTCGGCGAACTCGCCGCCGCCGCGCTCGCCGGGGTG
TGCGCGCCGGGGGCGGCGCTCCGGCTGCTCGCCGAACGGGACGCGGTGCTGCGCGCGGCG
CCGTCCGGGGGCATGCTCGCCGTGGCCGCGCCGGTGGACGACCTGCGCCCGTACGTGGGG
GCCGACGTGGTGGTGGGCGCGGTGAACGGGCCGCGTCAGACGGTGCTGTGCGGGCCGGAG
GCGCCGCTGCGCGCGGTGGCGCGGCGCCTGGCCGACGACGGGCTGACGGCGCGCCGCCTC
CAGGCGGACGTACCCTTCCACTCCCCCGCCCTCGCCGGGGCGGCGCGGCGTCTGACCAGG
GCGAGCGCGGAACGGGTCGCGCGGTGGCGGCCACCCGCCGTGCCCCTGTGGTCGGGCCGG
ACGGGTCGCGCGCTCACGCCGGGCGAGGCGGTGCGCGCCGCGTTCTGGTGCGGTCAGCTC
GCCGCCCCCGTCCTGTACTGGCCGGCGCTGGGGAACCTGCTCGCGACGGCGACGGCGACG
GCGACGACCACGGGCGGCGGGCGTGGCGTGGTGCTGCTCGACGCCTCGCCGGACGGCAGT
CTCGGCGCCCCGGCGCGCCGTCATCCGGCCGTCCGCTCGGGCGCGGCCCGTGTCGTTCGG
CTCCTGCCCGCGCGTCCCGGCGACCCCGCGGACGACGTGCGGGCCTTTCGCGCCGCGCTC
CAACAGGCGGGTCAGGTCGTACGGGACGGGGGCTGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR001227 Acyl transferase domain (Domain)
 [7-140]  1e-35 G3DSA:3.40.366.10 [204-309]  1e-35 G3DSA:3.40.366.10
G3DSA:3.40.366.10   Ac_transferase_reg
IPR014043 Acyl transferase (Domain)
 [19-279]  8.80000000000003e-32 PF00698
PF00698   Acyl_transf_1
IPR016035 Acyl transferase/acyl hydrolase/lysophospholipase (Domain)
 [15-275]  1.10000150671642e-32 SSF52151
SSF52151   Acyl_Trfase/lysoPlipase
IPR016036 Malonyl-CoA ACP transacylase, ACP-binding (Domain)
 [141-203]  2.19999900980708e-13 SSF55048
SSF55048   Malonyl_transacylase_ACP-bd
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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