Nogl_00180 : CDS information

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Organism
StrainATCC 27451 (=NBRC 13445)
Entry nameNogalamycin
Contig
Start / Stop / Direction17,690 / 18,862 / + [in whole cluster]
5,053 / 6,225 / + [in contig]
Location17690..18862 [in whole cluster]
5053..6225 [in contig]
TypeCDS
Length1,173 bp (390 aa)
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Category2.3 modification addition of sugar moiety
Productglycosyltransferase
Product (GenBank)putative glycosyl transferase
Gene
Gene (GenBank)snogD
EC number
Keyword
  • C-1 OH group
  • nogalamine
Note
Note (GenBank)
Reference
ACC
PmId
[11683270] The entire nogalamycin biosynthetic gene cluster of Streptomyces nogalater: characterization of a 20-kb DNA region and generation of hybrid structures. (Mol Genet Genomics. , 2001)
[22120896] Identification of late-stage glycosylation steps in the biosynthetic pathway of the anthracycline nogalamycin. (Chembiochem. , 2012)
[22804797] Crystal structure of the glycosyltransferase SnogD from the biosynthetic pathway of nogalamycin in Streptomyces nogalater. (FEBS J. , 2012)
comment
[PMID: 11683270](2001)
S. nogalater genomic DNA fragmentの配列解析と、異種性発現による産物解析。
nogalamycin生合成に関する20ORFsが明らかになった。

snogD: glycosyltransferase

snogDの産物は、iroB, UrdGT1b and urdGT1c, OleG1 and OleG2に似ている。
sno clusterには3つのGTsが同定されている(snogE, D, Z)が配列解析からは基質特定ができなかった。

---
[PMID: 22120896](2012)
aglycone生合成とdeoxysugar形成に必要な29ORFsを含むpSnogaoriを異種ホストS. albusに導入。
・3',4'-demethoxynogalose-1-hydroxynogalamycinone
・nogalamineがC-C結合ありrhodosamineで置換されたnogalamycin R
・nogalamineがC-C結合なし2-deoxyfucoseで置換されたnogalamycin F
がS. albus/pSnogaoriで産生された。

pSnogaoriにはGT候補snogZが含まれないが上記産物を得るので、deoxysugarの付着とC-C結合の形成にsnogZは必要ない。

残るGTs(snogEとsnogD)の機能検証のため、各geneをノックアウト。
S. albus/pSno-Delta-gE → nogalamycinone産生
S. albus/pSno-Delta-gD → 3',4'-demethoxynogalose-1-hydroxynogalamycinone産生

His-tag付きSnogDを用いて基質特異性を確認。
正反応での実験はうまくいかなかったので、多くのGTsは逆反応もできることを利用。

SnogD + nogalamycin F + UDP or TDP nucleotides
→ 3',4'-demethoxynogalose-1-hydroxynogalamycinone
への酵素依存形成でSnogDの活性を確認している。

UDP or TDP nucleotidesの存在は活性に必須。
さらなるインキュベーションでもnogaloseは除去されない。

よってSnogDはaglyconeのC1でのO-glycosylationを特異的に認識する。

---
[PMID: 22804797](2012)
recombinant SnogD(apo型とdUDP結合型)の構造解析。
2量体形成。
His25 and His301が、vivoでもvitroでも活性に重要。
Related Reference
ACC
C4NCL8
PmId
[20418426] Formation and attachment of the deoxysugar moiety and assembly of the gene cluster for caprazamycin biosynthesis. (Appl Environ Microbiol. , 2010)
comment
Blast 4th, id42%, 2e-65
Streptomyces sp. MK730-62F2_cpz31
Rhamnosyltransferase

E.coliで過剰発現、生成し、His-tagしたCpz31が、caprazamycin aglyconesにdTDP-L-rhamnoseを付着させることを確認している。

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selected fasta
>glycosyltransferase [putative glycosyl transferase]
MRVPGSCRTGGIMRALFITSPGLSHILPTVPLAQALRALGHEVRYATGGDIRAVAEAGLC
AVDVSPGVNYAKLFVPDDTDVTDPMHSEGLGEGFFAEMFARVSAVAVDGALRTARSWRPD
LVVHTPTQGAGPLTAAALQLPCVELPLGPADSEPGLGALIRRAMSKDYERHGVTGEPTGS
VRLTTTPPSVEALLPEDRRSPGAWPMRYVPYNGGAVLPDWLPPAAGRRRIAVTLGSIDAL
SGGIAKLAPLFSEVADVDAEFVLTLGGGDLALLGELPANVRVVEWIPLGALLETCDAIIH
HGGSGTLLTALAAGVPQCVIPHGSYQDTNRDVLTGLGIGFDAEAGSLGAEQCRRLLDDAG
LREAALRVRQEMSEMPPPAETAAKLVALAG
selected fasta
>glycosyltransferase [putative glycosyl transferase]
ATGCGTGTTCCAGGTTCATGTCGAACAGGGGGCATCATGCGTGCGTTGTTCATCACTTCA
CCCGGGCTCAGCCACATCCTGCCGACGGTGCCGCTGGCACAGGCGCTGCGCGCTCTCGGC
CACGAGGTCCGCTACGCCACGGGGGGCGACATCCGCGCCGTCGCGGAGGCCGGGCTGTGC
GCCGTGGACGTGTCGCCCGGCGTGAACTACGCGAAGCTGTTCGTGCCCGACGACACCGAC
GTCACCGACCCGATGCACTCCGAGGGGCTGGGCGAGGGCTTCTTCGCCGAGATGTTCGCC
CGGGTATCGGCGGTGGCCGTCGACGGGGCGCTGCGGACGGCGCGGAGCTGGCGGCCCGAC
CTCGTCGTGCACACTCCGACACAGGGCGCGGGCCCGCTGACGGCGGCAGCGCTGCAACTG
CCGTGCGTAGAGCTGCCGCTGGGTCCCGCGGACAGCGAGCCGGGGCTCGGCGCGCTCATC
CGGCGGGCGATGTCCAAGGACTACGAGCGCCACGGCGTCACCGGCGAGCCGACCGGTTCC
GTGCGGCTGACGACGACACCGCCGAGCGTGGAGGCGCTGCTGCCGGAGGACCGGCGCTCC
CCGGGTGCCTGGCCGATGCGGTACGTCCCCTACAACGGCGGAGCGGTGCTGCCGGACTGG
CTGCCGCCCGCGGCCGGCCGGCGGCGTATCGCGGTGACGCTGGGCTCCATCGACGCGCTG
TCGGGCGGCATCGCCAAGCTGGCCCCGCTGTTCTCCGAAGTGGCGGACGTGGACGCGGAG
TTCGTGCTGACCCTGGGCGGCGGCGACCTGGCCCTGCTCGGTGAACTGCCCGCGAACGTA
CGGGTGGTGGAGTGGATTCCGCTGGGCGCGCTGCTGGAGACGTGCGACGCGATCATCCAT
CACGGGGGCAGCGGCACACTGCTGACGGCCCTGGCCGCCGGCGTCCCGCAGTGCGTCATC
CCGCACGGCTCCTACCAGGACACCAACCGCGATGTGCTGACCGGGCTGGGCATCGGGTTC
GATGCCGAGGCGGGATCGCTGGGTGCCGAGCAGTGCCGACGGCTGCTGGACGACGCGGGG
TTGCGGGAGGCGGCCCTGCGGGTGCGGCAGGAGATGAGCGAGATGCCGCCGCCGGCCGAG
ACGGCCGCCAAGCTCGTGGCGCTGGCCGGCTGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR004276 Glycosyl transferase, family 28 (Domain)
 [24-138]  4.9e-08 PF03033
PF03033   Glyco_transf_28
IPR010610 Domain of unknown function DUF1205 (Domain)
 [185-281]  1.3e-26 PF06722
PF06722   DUF1205
SignalP
 [1-35]  0.652 Signal
Eukaryota   
 [1-35]  0.467 Signal
Bacteria, Gram-positive   
TMHMM No significant hit
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