Salino_01040 : CDS information

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Organism
StrainDSM 41398
Entry nameSalinomycin
Contig
Start / Stop / Direction185,492 / 184,269 / - [in whole cluster]
185,492 / 184,269 / - [in contig]
Locationcomplement(184269..185492) [in whole cluster]
complement(184269..185492) [in contig]
TypeCDS
Length1,224 bp (407 aa)
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Category3.3 modification reduction
Productputative cytochrome P450
Product (GenBank)cytochrome P450
Gene
Gene (GenBank)salD
EC number
Keyword
Note
  • The N-terminal position was modified from original INSDC entry.
Note (GenBank)
Reference
ACC
PmId
[22076845] A late-stage intermediate in salinomycin biosynthesis is revealed by specific mutation in the biosynthetic gene cluster. (Chembiochem. , 2012)
comment
monC gene-based hybridisation probeを使って、Streptomyces albus DSM 41398からsalinomycin(sal)生合成gene clusterを同定。

salD (393aa) : cytochrome P450

C-20でのhydroxylationはcytochrome P450 SalDによって触媒されると提唱される。
Related Reference
ACC
H6D582
NITE
Salino3_00260
PmId
[22156425] Cloning and characterization of the polyether salinomycin biosynthesis gene cluster of Streptomyces albus XM211. (Appl Environ Microbiol. , 2012)
comment
配列は[H1ZZU6]と全く同じ。株違い。

polyetherに特異的なepoxidaseの配列に基づいた縮重プライマーを用いてStreptomyces albus XM211からsalinomycin(sln)生合成gene clusterを同定。

SlnF (407aa) : Cytochrome P450

P450 monooxygenase SlnFとferredoxin SlnEはC-20でのhydroxylationを成し遂げるようだ。
しかし、置換によるslnF mutantはsalinomycin産生性を完全に失ったので、SlnFによるhydroxylationは成熟したpolyketide鎖がACPから放出される前に起こるかもしれない。
ACC
Q59523
PmId
[7808395] Characterization and expression of a P-450-like mycinamicin biosynthesis gene using a novel Micromonospora-Escherichia coli shuttle cosmid vector. (Mol Gen Genet. , 1994)
comment
Blast 11th, id48%, 3e-96
Micromonospora griseorubida_mycG
P-450-like protein

abstract:
塩基配列と変異の解析から、single P-450-like proteinがhydroxylation and epoxidation 両方の反応を触媒すると示唆される。
ACC
Q331R5
PmId
[21069297] Identification and characterization of gerPI and gerPII involved in epoxidation and hydroxylation of dihydrochalcolactone in Streptomyces species KCTC 0041BP. (Arch Microbiol. , 2011)
comment
Blast 13th, id47%, 5e-96
Streptomyces sp. KCTC 0041BP_gerPII
Cytochrome P-450

dihydrochalcomycin生合成clusterにある3つのCYP450のうち、gerPI, PII の特徴づけ。
gerPI の破壊は主に12,13-de-epoxydihydrochalcomycinを蓄積した。
gerPII の破壊は8-dehydroxy-12,13-de-epoxydihydrochalcomycinを蓄積した。
よって、GerPII がC-8でのhydroxylationを、続いてGerPI がC(12)-C(13) positionでのepoxidationを触媒する。
ACC
Q9KHJ7
NITE
Enter_00180
PmId
[11137817] Cloning, sequencing and analysis of the enterocin biosynthesis gene cluster from the marine isolate 'Streptomyces maritimus': evidence for the derailment of an aromatic polyketide synthase. (Chem Biol. , 2000)
[17704772] Enzymatic total synthesis of enterocin polyketides. (Nat Chem Biol. , 2007)
comment
Blast 19th, id48%, 5e-95
Streptomyces maritimus_encR
Putative p450 monooxygenase EncR

---
[PMID: 11137817](2000)
enterocin と wailupemycinsの生合成をコードするgene clusterの同定。

EncR: Cytochrome P-450 hydroxylase

monooxygenase inhibitorであるancymidol によって、S.maritimusでのenterocin産生は減り、5-deoxyenterocinが蓄積する。

EncRをクローニング、maltose-binding-protein(MBP) affinity tagを付けて精製。反応産物のLC-MS解析から、MBP-EncRは 5-deoxyenterocin → enterocin への変換をすることを実証。

またMBP-EncRはancymidol によって抑制されたので、in vivoでのancymidol による結果が、CYP450 EncR抑制のせいであることも確認された。

---
[PMID: 17704772](2007)
enc genesを異種性に発現して得たタンパクを用いて、enterocinをin vitroに合成している。

EncA/B, EncC, EncD, EncN, EncM, EncK, EncR, SgFabD + benzoic acid, ATP/Mg2+, NADPH, SAM, ferredoxin, ferredoxin-NADP+ reductase, catalaseでenterocin, wailupemycin F and Gの産生あり。

他のCYP450でも報告があるようにEncRはSAMで抑制されることがさらなる解析から明らかになったので、5-deoxyenterocinを含む nonpolar reaction productsを酸性条件下で抽出し、これがEncR-catalyzed reactionを受けてenterocinが得られることを確認した。

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selected fasta
>putative cytochrome P450 [cytochrome P450]
MPASKSSCPVAHGPVRDFPFTPVDGLVIEPVLAELRREEPISRIRLPYGGEAWLATRYQD
VRNALADPRLSRAAVVNADVPRRQEMQVGPEGIMYMDPPDHSRLRRLLTKAFTRRRVEML
RPRVAEIAAELAGDLAAQGSGGDLVSTFSWPLPTRVICELLGVPYEDREIFSRGADALMQ
GDTLPHAEFTSRINELCLYLAKLIAQRRAQPTEDMLTALIQARDEDDRLSEQELISISVV
LLAGGHETTANQITNFLYTLLRHPGQLALLREKPELMPQAVDELMRYIPLGTGHHAAMIA
TEDLEIGGQRIAEGESVYVHIHSANRDGEFFENPDELDLGREDNHHMGFGHGVHFCVGAQ
LARMELAVAVESVLDRFPTLELDIEDEAIRWRSSLLVRGPLALPVRW
selected fasta
>putative cytochrome P450 [cytochrome P450]
ATGCCTGCCTCAAAGTCTTCCTGTCCCGTCGCGCACGGGCCCGTGCGTGATTTCCCCTTC
ACCCCCGTCGACGGCCTGGTCATCGAGCCGGTCCTGGCCGAGCTGCGCCGCGAGGAGCCG
ATCAGCCGGATCCGCCTGCCCTACGGCGGCGAGGCCTGGCTCGCCACGCGCTACCAGGAC
GTACGCAACGCGCTCGCGGACCCGCGGCTCAGCCGCGCGGCGGTGGTGAACGCGGACGTA
CCGCGGCGCCAGGAGATGCAAGTGGGTCCCGAGGGGATCATGTACATGGACCCGCCCGAC
CACTCCCGGCTGCGGCGCCTGCTCACCAAGGCCTTCACCCGGCGGCGGGTGGAGATGCTG
CGGCCCCGGGTGGCCGAGATCGCCGCCGAACTCGCCGGGGACCTGGCCGCCCAGGGCAGC
GGCGGGGACCTGGTGTCCACCTTCTCCTGGCCGCTGCCCACCCGGGTGATCTGCGAACTG
CTCGGGGTGCCCTACGAGGACCGCGAGATCTTCAGCCGCGGCGCGGACGCGCTGATGCAG
GGCGACACCCTGCCGCACGCCGAGTTCACCTCCCGTATCAACGAACTCTGCCTGTATCTG
GCCAAGTTGATCGCCCAGCGCCGGGCGCAGCCGACCGAGGACATGCTCACCGCGCTGATC
CAGGCCCGGGACGAGGACGACCGGCTCAGCGAGCAGGAGCTGATCTCGATCTCCGTGGTG
CTCCTCGCCGGCGGCCACGAGACCACCGCGAACCAGATCACCAACTTCCTCTACACGCTG
CTGCGCCACCCCGGCCAACTCGCCCTGTTACGCGAGAAACCCGAGCTGATGCCGCAGGCC
GTGGACGAGCTGATGCGCTACATCCCGCTCGGCACCGGGCACCACGCCGCCATGATCGCG
ACGGAGGACCTGGAGATCGGCGGGCAGCGGATCGCCGAGGGTGAGTCCGTGTATGTACAC
ATACACTCGGCCAACCGGGACGGCGAGTTCTTCGAGAACCCGGACGAGCTCGACCTCGGC
CGCGAGGACAACCACCACATGGGCTTCGGCCACGGGGTCCACTTCTGCGTGGGCGCCCAA
CTCGCCCGGATGGAACTGGCGGTGGCCGTCGAATCCGTACTGGACCGCTTCCCCACCCTG
GAGCTGGACATCGAGGACGAGGCGATCCGCTGGCGCTCCAGCCTGCTGGTCCGCGGGCCG
CTCGCGCTGCCGGTGCGCTGGTGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR001128 Cytochrome P450 (Family)
 [7-407]  6.80004680300024e-101 SSF48264
SSF48264   Cytochrome_P450
 [244-261]  5.99999702863249e-07 PR00385 [279-290]  5.99999702863249e-07 PR00385 [347-356]  5.99999702863249e-07 PR00385 [356-367]  5.99999702863249e-07 PR00385
PR00385   P450
 [206-379]  4.00000000000001e-26 PF00067
PF00067   p450
 [22-407]  1.10000000000001e-112 G3DSA:1.10.630.10
G3DSA:1.10.630.10   Cyt_P450
IPR002397 Cytochrome P450, B-class (Family)
 [96-107]  3.10001307370206e-57 PR00359 [143-159]  3.10001307370206e-57 PR00359 [160-175]  3.10001307370206e-57 PR00359 [198-220]  3.10001307370206e-57 PR00359 [279-290]  3.10001307370206e-57 PR00359 [298-325]  3.10001307370206e-57 PR00359 [326-341]  3.10001307370206e-57 PR00359 [347-356]  3.10001307370206e-57 PR00359 [356-367]  3.10001307370206e-57 PR00359
PR00359   BP450
IPR017972 Cytochrome P450, conserved site (Conserved_site)
 [349-358]  PS00086
PS00086   CYTOCHROME_P450
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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