Vanco_00180 : CDS information

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Organism
StrainATCC 19795 (=NBRC 12806)
Entry nameVancomycin
Contig
Start / Stop / Direction45,500 / 46,726 / + [in whole cluster]
45,500 / 46,726 / + [in contig]
Location45500..46726 [in whole cluster]
45500..46726 [in contig]
TypeCDS
Length1,227 bp (408 aa)
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Category2.3 modification addition of sugar moiety
Productputative dTDP-3-amino-4-keto-2,3,6-trideoxy-D-glucose C-3 C-methyltransferase
Product (GenBank)putative C-3 methyltransferase
Gene
Gene (GenBank)vcaC
EC number2.1.1.-
Keyword
  • L-vancosamine
Note
Note (GenBank)
Reference
ACC
comment
A. orientalis ATCC 19795でのvancomycin生合成 gene clusterとして配列が登録されているが、cluster報告論文なし。このORFに関する続報もなし。
Related Reference
ACC
R4SV93
PmId
[24884615] Complete genome sequence and comparative genomic analyses of the vancomycin-producing Amycolatopsis orientalis. (BMC Genomics. , 2014)
comment
BLAST id95%
Amycolatopsis orientalis HCCB10007_(AORI_1488)

vancomycinの大量産生に使用されているA. orientalis ATCC 43491由来工業用菌株HCCB10007の完全ゲノムシークエンス。そこからvcm cluster(AORI_1471-1505)を同定し、いくつかの遺伝子のmutantsを作製してin vivo機能を特徴づけている。

AORI_1488(vcaC): Methyltransferase family protein

このORFに関しては配列解析のみ。
Figure 5ではVasCとされていて、dTDP-L-vancosamineの生合成に割り当てられている。
ACC
P96561
NITE
Chlor_00150
PmId
[11035791] Deoxysugars in glycopeptide antibiotics: enzymatic synthesis of TDP-L-epivancosamine in chloroeremomycin biosynthesis. (Proc Natl Acad Sci U S A. , 2000)
comment
BLAST id93%
Amycolatopsis orientalis (Nocardia orientalis)
PCZA361.22
ORF14(EvaC)に相当するentry.

dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucoseからdTDP-L-epivancosamineを生合成する5つの酵素を、E.coliで発現・精製し、特徴づけしている。

ORF23はdTDP-6-deoxy-4-keto-D-glucoseを基質として、2,6-dideoxy-3,4-diketo-dTDP sugarの分解化合物をもたらした。ORF23とORF25の組み合わせは、C-3アミノ基がequatorialなdTDP-3-amino-2,3,6-trideoxy-D-threo-hexopyranos-4-uloseをもたらした。さらにORF14を加えた組み合わせで補助基質としてSAMを使用すると、C-3メチル基がequatorialなdTDP-3-amino-2,3,6-trideoxy-3-C-methyl-D-erythro-hexopyranos-4-uloseをもたらした。

また、ORF14によるdTDP-3-amino-2,3,6-trideoxy-D-threo-hexopyranos-4-uloseのC-methylationが、1.14ppmでのmethyl peakによって確認された。

すべての結果から提唱されている経路は次の通り。

dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucose

↓ ORF23(EvaA): C-2 deoxygenation

↓ ORF25(EvaB): C-3 amination

dTDP-3-amino-2,3,6-trideoxy-D-threo-hexopyranos-4-ulose

↓ ORF14(EvaC): C-3 methylation

dTDP-3-amino-2,3,6-trideoxy-3-C-methyl-D-erythro-hexopyranos-4-ulose

↓ ORF26(EvaD): C-5 epimerization

↓ ORF24(EvaE): C-4 ketoreduction

dTDP-L-epivancosamine

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selected fasta
>putative dTDP-3-amino-4-keto-2,3,6-trideoxy-D-glucose C-3 C-methyltransferase [putative C-3 methyltransferase]
MSTTSQCRICDGTVTEFIDFGRQPLSDAFVVPGDEKKEFFFRLATGICESCTMVQLMEEV
PRDLMFHEAYPYHSSGSAVMRTHFHDLAKRFLTTELTGEDPFIVELGCNDGIMLKAIAEA
GVRQLGVEPSGGVADLAAAKGIRVRKDFFEEATAADIRKNDGPADVIYAANTLCHIPYMD
SILKGVTTLLGPNGVFVFEDPYLGDIVERTSFDQIYDEHFFFFTARSVQEMARRNGLELV
DVERIPVHGGEVRYTLALAGARKPTEAVAELLAWEAERKLSEFATLERFAANVKKVKEDL
IALLTKLRAEGKRVVGYGATAKSATVTNFCGITPDLVEFISDTTPAKQGKLSPGQHIPVR
EYREFADDHPDYALLFAWNHADEIMNAEQAFRDAGGQWIRYVPNVHVS
selected fasta
>putative dTDP-3-amino-4-keto-2,3,6-trideoxy-D-glucose C-3 C-methyltransferase [putative C-3 methyltransferase]
ATGTCGACCACGTCCCAGTGCCGTATCTGTGACGGCACCGTCACCGAGTTCATCGACTTC
GGACGTCAGCCGCTTTCGGACGCGTTCGTGGTTCCCGGTGACGAGAAGAAGGAGTTCTTC
TTCCGGCTCGCCACCGGGATCTGCGAGTCCTGCACGATGGTGCAGCTGATGGAAGAGGTC
CCGCGGGACCTGATGTTCCACGAGGCATACCCCTACCACTCGTCCGGTTCGGCCGTCATG
CGCACGCATTTCCACGATCTGGCCAAACGCTTCCTGACCACGGAGCTGACCGGCGAGGAC
CCGTTCATCGTCGAACTCGGCTGCAACGACGGCATCATGCTCAAGGCCATCGCGGAGGCG
GGAGTGCGCCAGCTCGGCGTCGAACCCTCCGGCGGTGTCGCGGATCTGGCCGCGGCCAAG
GGAATCCGCGTCCGCAAGGACTTCTTCGAAGAGGCGACGGCGGCCGACATCCGGAAGAAC
GACGGCCCCGCCGACGTGATCTACGCGGCCAACACCCTGTGCCACATCCCTTACATGGAC
TCGATCCTCAAGGGCGTCACCACCTTGCTGGGCCCGAACGGCGTGTTCGTGTTCGAGGAC
CCGTACCTCGGTGACATCGTCGAGCGCACGTCGTTCGACCAGATCTACGACGAGCATTTC
TTCTTCTTCACCGCGCGCTCGGTGCAGGAGATGGCCCGGCGCAACGGGCTCGAACTCGTG
GACGTCGAGCGCATCCCGGTGCACGGCGGCGAGGTCCGCTACACCCTCGCCCTCGCCGGG
GCCCGCAAGCCGACCGAGGCCGTGGCGGAACTCCTGGCGTGGGAGGCGGAGCGCAAGCTG
TCCGAGTTCGCCACGCTGGAACGCTTCGCCGCCAACGTGAAGAAGGTCAAGGAAGACCTC
ATCGCGCTGCTGACCAAGCTCCGCGCCGAGGGCAAACGCGTCGTCGGCTACGGCGCGACG
GCCAAGAGCGCCACGGTGACCAACTTCTGTGGCATCACCCCGGATCTGGTCGAGTTCATC
TCGGACACCACTCCCGCCAAACAGGGCAAGCTCAGCCCGGGGCAGCACATCCCGGTCCGC
GAGTACCGGGAGTTCGCCGACGATCACCCCGACTACGCGCTGCTGTTCGCCTGGAACCAC
GCCGACGAGATCATGAACGCGGAGCAGGCTTTCCGTGACGCCGGTGGGCAGTGGATCCGG
TACGTGCCGAACGTGCACGTGAGCTGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR013630 Methyltransferase putative zinc binding domain (Domain)
 [7-67]  1.69999999999999e-20 PF08421
PF08421   Methyltransf_13
IPR013691 C-methyltransferase (Domain)
 [245-403]  2.89999999999999e-56 PF08484
PF08484   Methyltransf_14
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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