A4092_00080 : CDS information

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Organism
StrainATCC 39727
Entry nameA40926
Contig
Start / Stop / Direction8,531 / 7,461 / - [in whole cluster]
8,531 / 7,461 / - [in contig]
Locationcomplement(7461..8531) [in whole cluster]
complement(7461..8531) [in contig]
TypeCDS
Length1,071 bp (356 aa)
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Category2.1 modification addition of extender units
Productputative 4-hydroxymandelate synthase
Product (GenBank)putative hydroxymandelate synthase
Genedbv2
hmaS
Gene (GenBank)dbv2
EC number1.13.11.46
Keyword
  • Hpg
Note
Note (GenBank)
Reference
ACC
PmId
[12837387] The gene cluster for the biosynthesis of the glycopeptide antibiotic A40926 by nonomuraea species. (Chem Biol. , 2003)
[17873036] Phosphate-controlled regulator for the biosynthesis of the dalbavancin precursor A40926. (J Bacteriol. , 2007)
[25986904] Two Master Switch Regulators Trigger A40926 Biosynthesis in Nonomuraea sp. Strain ATCC 39727. (J Bacteriol. , 2015)
comment
[PMID: 12837387](2003)
Nonomuraea sp. ATCC39727由来A40926生合成gene clusterの同定論文。
A40926は半合成グリコペプチドdalbavancin (BI397 or MDL 62,397)の前駆体。

dbv ORF2: HmaS

配列解析のみ。ORF1はp-hydroxymandelate oxidase (Hmo) に、ORF2はp-hydroxymandelate synthetase (HmaS) に配列相同性があり、p-hydroxyphenylglycine (HPG)合成の際の
p-hydroxyphenylpyruvate → p-hydroxyphenylglyoxylate の変換に必要とされる。

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このORFの発現調節についての報告

[PMID: 17873036](2007)
RT-PCRとその産物のシークエンスで、dbv1-dbv2が同時転写されることを確認。
リン酸による遺伝子発現への影響がRT-PCR と real-time RT-PCRで調査されている。dbv1は影響を受けない。

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[PMID: 25986904](2015)
dbv clusterにあるregulatory genes dbv3, dbv4, dbv6についての調査。

dbv3の不活化株と過剰発現株からRNAを抽出してqRT-PCR解析した結果と既に確立されているオペロン構造から、Dbv3は6つのオペロン(dbv2-dbv1, dbv14-dbv8, dbv17-dbv15, dbv21-dbv20, dbv24-dbv28, dbv30-dbv35)と4つのmonocistronic transcription units dbv4, dbv29, dbv36, dbv37のpositive regulatorとして働くことが示された。
Related Reference
ACC
O52791
NITE
Chlor_00220
PmId
[11137816] Biosynthesis of L-p-hydroxyphenylglycine, a non-proteinogenic amino acid constituent of peptide antibiotics. (Chem Biol. , 2000)
[18215022] Two roads diverged: the structure of hydroxymandelate synthase from Amycolatopsis orientalis in complex with 4-hydroxymandelate. (Biochemistry. , 2008)
comment
BLAST id62%
Amycolatopsis orientalis
4-hydroxymandelate synthase (EC:1.13.11.46)

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[PMID: 11137816](2000)
L-p-hydroxyphenylglycine(Hpg)はvancomycinグループの抗生物質のaglyconeで構造的役割をする。L-p-hydroxyphenylglycineを生合成する経路に提唱された酵素の特徴づけを、chloroeremomycin生合成gene clusterのタンパクで確認している。

ORF21のアミノ酸配列は、酸化的チロシン分解の際にp-hydroxyphenylpyruvate → homogentisateへの変換を触媒するp-hydroxyphenylpyruvate dioxygenasesに似ている。

ORF21をN末His-tag付きapo型タンパクとして精製。過剰FeCl2でpreincubationすることでholo型を再構成し実験に使用している。このholo酵素は反応液中アスコルビン酸により活性型となる。

holo-ORF21は、p-hydroxyphenylpyruvate → p-hydroxymandelateへの変換を触媒することをHPLCで確認。L-p-hydroxyphenylglycine生合成経路の次の酵素ORF22(Hmo)とのin situ couplingにより、ベンジル位でのhydroxylateは立体特異的で、L-p-hydroxymandelateが得られることも確立されている。

Chorobaら(2000)も関連した報告をしていることが引用されているが、PubMedに未登録の論文である。この論文での命名に揃えて、ORF21は4-hydroxymandelate synthase(HmaS)と名付けられている。

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[PMID: 18215022](2008)
hydroxymandelate synthase (HMS)が形成する複合体の結晶構造解析。基質は同じだが産物の異なる4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD)と比較している。

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selected fasta
>putative 4-hydroxymandelate synthase [putative hydroxymandelate synthase]
MESLPPLAVDYVEMYVADLKVATLPWTDEYRFAVVGTANASDHRSVALRQGRITLVLTQA
TSDGHPASAYVRTHGDGVADIALRTPDVDVVFTHAVAAGARPVRSPSRHPGPGPACSAAI
GGFGDVVHTLVQRDPGDDPGLPVGFSEAPSAAESGADAAELLDIDHFAVCLPTGDLDIIT
DFYVATLGFSETFKERIEVGTQAMESKVVQSASGAVTLTLIEPDPMAEAGQIDMFLERHA
GAGVQHVAFSSSDAVHAVNTLSERGVRFLSTPGSYYDLLESRIQIRGHTVDQLRATGLLA
DEDHGGQLFQIFTASTHPRETLFFEVIERQGARTFGGANIKALYEAVEVARSQQRA
selected fasta
>putative 4-hydroxymandelate synthase [putative hydroxymandelate synthase]
ATGGAATCGCTTCCGCCTCTCGCCGTTGATTACGTCGAAATGTACGTAGCGGATCTGAAG
GTCGCCACTCTCCCTTGGACCGACGAATACCGCTTCGCCGTCGTGGGCACGGCGAACGCC
AGCGACCATCGCAGCGTCGCGCTCCGGCAGGGCCGCATCACCCTCGTCCTCACCCAGGCC
ACGTCCGACGGCCATCCGGCTTCGGCCTATGTGCGGACGCACGGCGACGGGGTCGCCGAC
ATCGCCCTGCGGACCCCCGACGTCGACGTCGTCTTCACCCATGCCGTGGCCGCCGGCGCC
CGGCCCGTACGGTCCCCGTCCCGGCACCCCGGCCCCGGGCCGGCCTGCTCCGCCGCGATC
GGCGGCTTCGGCGACGTGGTCCACACCCTCGTCCAGCGGGACCCCGGCGACGACCCCGGC
CTGCCGGTCGGCTTCTCCGAGGCTCCGTCCGCCGCCGAGTCCGGTGCGGACGCGGCGGAG
CTGCTCGACATCGACCACTTCGCCGTGTGCCTGCCCACGGGTGACCTCGACATCATCACC
GACTTCTACGTCGCCACCCTCGGCTTCAGCGAGACCTTCAAGGAACGCATCGAGGTCGGC
ACCCAGGCCATGGAGTCCAAGGTGGTGCAGAGCGCCTCCGGCGCCGTCACGCTGACACTC
ATCGAACCCGACCCGATGGCCGAGGCCGGCCAGATCGACATGTTCCTCGAACGGCACGCC
GGTGCCGGGGTGCAGCACGTCGCCTTCTCCTCCTCGGACGCCGTGCACGCCGTGAACACC
CTGTCCGAGCGGGGCGTCCGCTTCCTCAGCACGCCGGGCAGCTACTACGACCTGCTCGAA
TCACGGATCCAGATCCGGGGTCACACGGTGGACCAGTTGCGCGCGACGGGACTGCTCGCT
GACGAGGATCACGGCGGACAGCTCTTCCAGATCTTCACGGCGTCCACCCATCCGCGCGAG
ACCCTCTTCTTCGAGGTCATCGAGCGGCAGGGAGCCCGCACCTTCGGAGGCGCCAACATC
AAGGCCCTCTACGAGGCCGTCGAGGTGGCGAGGTCCCAGCAGCGTGCATGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR004360 Glyoxalase/fosfomycin resistance/dioxygenase domain (Domain)
 [164-311]  6.50000000000001e-16 PF00903
PF00903   Glyoxalase
IPR005956 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (Family)
 [9-354]  9.49999999999983e-105 TIGR01263
TIGR01263   4HPPD
 [1-355]  1.29998211665775e-130 PIRSF009283
PIRSF009283   HPP_dOase
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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