Acla_00110 : CDS information

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Organism
StrainATCC 31615
Entry nameAclacinomycin A
Contig
Start / Stop / Direction9,414 / 10,457 / + [in whole cluster]
9,414 / 10,457 / + [in contig]
Location9414..10457 [in whole cluster]
9414..10457 [in contig]
TypeCDS
Length1,044 bp (347 aa)
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Category1.4 Other
Productputative acyl-ACP thioesterase
Product (GenBank)AknF
Gene
Gene (GenBank)aknF
EC number
Keyword
  • type II thioesterase
  • non-acetate starter unit
Note
Note (GenBank)
  • similar to DpsD
Reference
ACC
PmId
[12137949] Cloning and characterization of Streptomyces galilaeus aclacinomycins polyketide synthase (PKS) cluster. (Gene. , 2002)
comment
aclacinomycin PKSを含んだ13.5kb領域のクローニング、シークエンス報告論文。

AknF: acyltransferase

polyketide形成の開始で役割を果たすかもしれないDpsDに相同性あり。

plasmid pSgsPCR6(aknBCDE2F)は、S.galilaeusのminimal PKS不全mutant H071を相補し、anthracyclinone産生を回復。

S.lividans TK24 and A.coelicolor CH999において、pMC10aM導入でauramycinone(C9はmethyl基=acetate由来)産生。
pMC10aMのminimal PKS genes(snoa123)をaclacinomycin clusterのminimal PKS genes(aknBCDE2F)で置換して導入するとaklavinone(C9はethyl基=propionate由来)産生。
Related Reference
ACC
Q9KHK3
NITE
Enter_00120
PmId
[21531566] Policing starter unit selection of the enterocin type II polyketide synthase by the type II thioesterase EncL. (Bioorg Med Chem. , 2011)
comment
Blast 15th, id51%, 1e-72
Streptomyces maritimus_encL
Putative acyl transferase EncL

encL mutantはwildと類似したレベルのenterocinを産生。
encABCNDを含んだplasmidを異種性発現すると、benzoate-primed polyketides wailupemycinsを産生。

8His-tagged EncLをE.coliで産生してin vitro実験に使用。
EncABC + malonyl-CoA でuncharacterized acetate primed polyketidesが産生されるが、この反応にEncLを加えるとこれらの産物が減る。
EncABCN + benzoyl-CoA, malonyl-CoA でbenzoate-primed wailupemycinsが産生されるが、この反応にEncLを加えるとこれらの産物が増える。

acetyl- and benzoyl-EncC に EncLを加えたときのholo-EncC, acetyl-EncC, and benzoyl-EncCの量をタイムコースで定量。
acetyl-EncCはEncLを加えて30秒後に枯渇。これに対応するholo-EncC増加あり。
benzoyl-EncCは相対的にゆっくり加水分解された。

これらの結果からEncLは、misprimed acetyl-ACP(EncC)を加水分解してEncCに戻すことにより正しいstarter unit benzoyl-ACP(EncC)が取り込まれ、enterocin合成が進むようにすると提唱。
ACC
Q9F6D9
NITE
R1128_00030
PmId
[15260498] The acyltransferase homologue from the initiation module of the R1128 polyketide synthase is an acyl-ACP thioesterase that edits acetyl primer units. (Biochemistry. , 2004)
comment
Blast 16th, id52%, 1e-67
Streptomyces sp. R1128_zhuC
Acyl transferase

tcm minimal PKS genesとの発現でZhuCの役割を確認。
tcm minimal PKSは非acetateなacyl基で直接primeされることができる。
ZhuCがあるとacetate-primed decaketides合成がなくなり、hexanoyl-primed octaketides合成のみになる。
ZhuCは、hexanoyl- and octanoyl-ACPより100倍よい特異性をacetyl- and propionyl-ACPに持つ。
ZhuCはacyl-ZhuG から holo-ZhuNへのtransacylationを触媒するが、そのacyl移動率はin vivoで生理学的に関連するためには遅すぎる。

よってZhuCはacetyl-ACP thioesteraseとして働き、PKS伸長moduleをprimeするalkylacyl-ZhuGと競合するacetate primer unitsを一掃する。

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selected fasta
>putative acyl-ACP thioesterase [AknF]
MTGTAGALPVALLLPGQGSQHRRMAAGLYGHEPVFTEAMDEFFDAAGPEGDPLRDDWLAE
RPVTDIDHVTRSQPLLFAVDHALGRLVLGRGVRPAALLGHSIGELAAATLAGVFAPRDAA
GLVLDRIRRLSAAPPGGMLAVAASTAEVAPYLRGDVVVGAVNAPRQTVLAGPDGPLDEVD
RALREAGFVCRRVPSLSAFHSPVLEPACRGAAPLFAAACKHPPAVPVHSAYTAAPLTESD
IDDPAFWARQPVAPVLFWPALEGLLATGDHLLVEVGPGQGLSQLVRRHPAVRRGGSAVVS
LLPARPGPPEADRAAVAAATEQITAAGRQAAPASADHGRPSRQAAAG
selected fasta
>putative acyl-ACP thioesterase [AknF]
GTGACCGGCACCGCGGGGGCCCTGCCGGTCGCCCTGCTGCTGCCGGGCCAGGGCTCCCAG
CACCGGCGGATGGCCGCGGGGCTCTACGGGCACGAGCCGGTGTTCACCGAGGCCATGGAC
GAGTTCTTCGACGCGGCCGGCCCCGAGGGCGATCCGCTGCGCGACGACTGGCTGGCCGAA
CGGCCCGTCACGGACATCGACCACGTCACCCGCTCACAGCCGCTGCTCTTCGCCGTGGAC
CACGCGCTGGGGCGGCTGGTGCTCGGCCGGGGTGTGCGCCCGGCGGCCCTCCTGGGGCAC
AGTATCGGGGAGCTGGCGGCGGCCACGCTGGCCGGGGTGTTCGCTCCGCGGGACGCCGCC
GGCCTGGTGCTCGACCGGATACGGCGGCTGTCGGCGGCTCCGCCGGGCGGCATGCTCGCG
GTGGCCGCGTCCACGGCGGAGGTGGCCCCGTACCTGAGGGGAGACGTCGTGGTCGGCGCG
GTCAACGCCCCGCGGCAGACCGTGCTCGCCGGACCCGACGGCCCGCTGGACGAGGTGGAC
CGTGCCCTGCGGGAGGCCGGGTTCGTCTGCCGCCGGGTGCCGTCGCTGAGCGCCTTCCAC
AGCCCGGTGCTCGAACCCGCCTGCCGGGGGGCGGCCCCTCTCTTCGCCGCGGCCTGCAAG
CATCCGCCGGCCGTGCCGGTCCACTCCGCCTACACCGCCGCCCCGCTGACGGAGTCAGAC
ATCGACGACCCCGCCTTCTGGGCGCGGCAGCCGGTGGCGCCGGTGCTGTTCTGGCCCGCT
CTGGAAGGGCTGCTGGCCACCGGCGACCATCTGCTGGTGGAGGTGGGGCCGGGACAAGGG
CTGTCCCAGCTGGTCCGCCGTCACCCGGCTGTGCGCCGGGGCGGCAGTGCCGTGGTGTCG
CTGCTTCCGGCGCGGCCGGGGCCGCCGGAGGCGGACCGGGCCGCGGTGGCCGCCGCCACG
GAGCAGATCACGGCGGCGGGGCGCCAGGCCGCCCCCGCGAGCGCGGACCACGGCCGGCCG
TCACGGCAGGCCGCGGCCGGCTGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR001227 Acyl transferase domain (Domain)
 [5-133]  3.40000000000004e-48 G3DSA:3.40.366.10 [197-295]  3.40000000000004e-48 G3DSA:3.40.366.10
G3DSA:3.40.366.10   Ac_transferase_reg
IPR014043 Acyl transferase (Domain)
 [14-285]  9e-43 PF00698
PF00698   Acyl_transf_1
IPR016035 Acyl transferase/acyl hydrolase/lysophospholipase (Domain)
 [9-289]  4.30000170645869e-45 SSF52151
SSF52151   Acyl_Trfase/lysoPlipase
IPR016036 Malonyl-CoA ACP transacylase, ACP-binding (Domain)
 [134-194]  3.50000235434314e-12 SSF55048
SSF55048   Malonyl_transacylase_ACP-bd
SignalP
 [1-25]  0.225 Signal
Bacteria, Gram-positive   
 [1-18]  0.972 Signal
Eukaryota   
TMHMM No significant hit
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