Strply_00120 : CDS information

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Organism
StrainNRRL 2433 (=NBRC 13058)
Entry nameStreptolydigin
Contig
Start / Stop / Direction15,342 / 14,101 / - [in whole cluster]
15,342 / 14,101 / - [in contig]
Locationcomplement(14101..15342) [in whole cluster]
complement(14101..15342) [in contig]
TypeCDS
Length1,242 bp (413 aa)
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Category3.3 modification reduction
Productputative cytochrome P450
Product (GenBank)cytochrome P450
Gene
Gene (GenBank)slgO2
EC number
Keyword
Note
Note (GenBank)
Reference
ACC
PmId
[19875077] Deciphering biosynthesis of the RNA polymerase inhibitor streptolydigin and generation of glycosylated derivatives. (Chem Biol. , 2009)
[22569159] Novel compounds produced by Streptomyces lydicus NRRL 2433 engineered mutants altered in the biosynthesis of streptolydigin. (J Antibiot (Tokyo). , 2012)
comment
[PMID:19875077]
streptolydigin生合成gene clusterの報告。

上流ORFの挿入変異株の解析より、本ORFはstreptolydigin生産に関与する領域(PKS-NRPS system)であることが示されている。

SlgO1,SlgO2はcytochrome P450と相同性あり
O2 binding site、及びC末にheme binding domainを保存している。

cytochrome P450によるepoxide groupの導入後、SlgMによるN-メチル化が起こると推測している。

本ORFの機能解析実験はされていない。


[PMID:22569159]
SlgN1, SlgN2, SlgL, SlgO2遺伝子の欠損株を作製し、機能同定を行っている。

slgO2欠損株の培養抽出液をUPLCで検出(360nm)すると、streptolydiginや他の中間体のいずれも示さなかった。slgO2 geneの挿入でstreptolydigin生産は回復した。したがって、SlgO2はstreptolydigin生合成に関与する遺伝子だとしている。

slgO2欠損株において生産されたstreptolydigin analogの構造から、SlgO2はstreptolydiginの中で二環式ケタールの形成に関与していると考えられた。

また、TrdI,TamI(tetramic acid tirandamycin生合成においてoxidative modificationに関与するcytochromes P450)との相同性はSlgO1よりもSlgO2の方が低い。さらに、slgO2欠損株ではtrdI,tamI欠損株で生産されたようなoxidative modificationを欠いた中間体を生産しない。
以上より、SlgO2がstreptolydigin 二環式ケタール形成のための酸化的反応に関与し、SlgO1がstreptolydigin eposide moietyに関与すると推測している。
Related Reference
ACC
P33271
PmId
[1732208] Characterization of Saccharopolyspora erythraea cytochrome P-450 genes and enzymes, including 6-deoxyerythronolide B hydroxylase. (J Bacteriol. , 1992)
comment
Saccharopolyspora erythraea_CYP107B1
Cytochrome P450 107B1(EC 1.14.-.-)
orf405に相当するentry.

catalytically active cytochrome P-450 fractionより、majorなものとminorな種類の P-450 を精製し、各々の遺伝子orf405(major) とeryF(minor)の遺伝子をクローニングしている。また、各々の遺伝子をE. coliで発現させて活性を調べ、EryFは6-deoxyerythronolide B hydroxylase activityを持つのに対して、Orf405は6-deoxyerythronolide B hydroxylase activityを持たないこと、EryF, Orf405共に弱いながらも7-ethoxycoumarinのO-dealkylation活性を持つことが示されている。

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selected fasta
>putative cytochrome P450 [cytochrome P450]
MSERTPVADAFGDADFMQDPHAVYRRLREQGPVHRTTLPKGVPLFGGLPVWVVSTYSAVR
AALTDPRLSTDLKHTSALFARHGTDTAGGAFGAVLARHMLHSDQPDHTRLRKLVNKAFTP
GAVDRLRPRIEDITSGLLDAMKGREQVDLLEEFAFPLPVTVICELLGVPEADRADFTRWS
QRLVSGPSAEEVAAAQASMVGYLTELTAAKRAEPQDDILSALVQARDEGDRLADSELVPM
AFLLLVGGHETTTNLIGNGTLHLLRDRTKLRALLDDPALLPNAVEEFLRFEGPIKHATFR
YTTDEVEVDGVRIPAGELVLVSLVSANRDGERFTDPDRLDLTRAPGGNLAFGHGIHYCVG
APLARLEAQIAFRQLLERYPDMELAAEPAELYWRASTLMRGLHSLPVRLGGGG
selected fasta
>putative cytochrome P450 [cytochrome P450]
ATGAGCGAGCGGACACCGGTCGCGGACGCCTTCGGCGACGCCGACTTCATGCAGGACCCG
CACGCGGTCTACCGGCGGCTGCGCGAGCAGGGCCCGGTGCACCGCACCACGCTCCCCAAG
GGCGTACCGCTCTTCGGCGGGCTGCCGGTGTGGGTGGTCAGCACGTACTCCGCGGTGCGG
GCCGCGCTGACCGACCCCCGGCTGAGCACCGACCTCAAACACACCAGCGCGCTGTTCGCC
CGGCACGGCACCGACACCGCCGGCGGCGCGTTCGGCGCGGTGCTCGCCCGGCACATGCTC
CACTCCGACCAGCCGGACCACACCCGGCTGCGCAAACTGGTCAACAAGGCGTTCACCCCG
GGCGCCGTGGACCGGCTGCGGCCGCGCATCGAGGACATCACCAGCGGCCTGCTGGACGCC
ATGAAGGGGCGCGAACAGGTCGACCTGCTGGAGGAGTTCGCCTTCCCGCTGCCGGTCACC
GTCATCTGCGAACTGCTCGGCGTCCCCGAGGCCGACCGGGCCGACTTCACGCGCTGGTCC
CAGCGCCTGGTCTCCGGCCCCTCCGCCGAGGAGGTCGCCGCCGCCCAGGCGTCGATGGTC
GGCTACCTGACCGAGCTGACCGCGGCCAAGCGCGCCGAGCCGCAGGACGACATCCTCAGC
GCCCTGGTCCAGGCCCGCGACGAGGGCGACCGCCTCGCCGACAGCGAACTGGTCCCGATG
GCGTTCCTGCTGCTGGTCGGCGGACACGAGACGACCACCAACCTGATCGGCAACGGCACC
CTCCATCTGCTGCGCGACCGCACCAAGCTGCGTGCCCTGCTCGACGATCCGGCCCTGCTG
CCCAACGCGGTCGAGGAGTTCCTGCGGTTCGAAGGGCCCATCAAGCACGCCACGTTCCGG
TACACCACCGACGAGGTCGAGGTGGACGGCGTCCGCATCCCCGCCGGGGAACTGGTCCTC
GTTTCACTGGTGTCCGCCAATCGCGACGGCGAGCGCTTCACCGACCCGGACCGGCTCGAC
CTGACCCGCGCGCCCGGCGGCAACCTGGCCTTCGGCCACGGCATCCACTACTGCGTCGGC
GCGCCCCTCGCCCGCCTCGAAGCGCAGATCGCCTTCCGCCAACTCCTTGAACGCTACCCG
GACATGGAGCTGGCGGCCGAGCCGGCCGAGCTGTACTGGCGGGCCAGCACCCTGATGCGG
GGCCTGCACTCGCTGCCCGTCCGCCTCGGGGGCGGCGGATGA

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR001128 Cytochrome P450 (Family)
 [13-409]  1.20000000000001e-120 G3DSA:1.10.630.10
G3DSA:1.10.630.10   Cyt_P450
 [15-409]  1.90000694315261e-105 SSF48264
SSF48264   Cytochrome_P450
 [191-379]  1.8e-18 PF00067
PF00067   p450
IPR002397 Cytochrome P450, B-class (Family)
 [102-113]  4.50001022902825e-61 PR00359 [148-164]  4.50001022902825e-61 PR00359 [165-180]  4.50001022902825e-61 PR00359 [201-223]  4.50001022902825e-61 PR00359 [282-293]  4.50001022902825e-61 PR00359 [300-327]  4.50001022902825e-61 PR00359 [328-343]  4.50001022902825e-61 PR00359 [349-358]  4.50001022902825e-61 PR00359 [358-369]  4.50001022902825e-61 PR00359
PR00359   BP450
IPR017972 Cytochrome P450, conserved site (Conserved_site)
 [351-360]  PS00086
PS00086   CYTOCHROME_P450
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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