Tetrn_00220 : CDS information

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Organism
StrainNRRL 11266
Entry nameTetronomycin
Contig
Start / Stop / Direction86,793 / 88,694 / + [in whole cluster]
86,793 / 88,694 / + [in contig]
Location86793..88694 [in whole cluster]
86793..88694 [in contig]
TypeCDS
Length1,902 bp (633 aa)
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Category2.1 modification addition of extender units
Productglyceroyl-ACP biosynthesis protein
1,3-bisphospho-D-glycerate phosphatase/glyceroyltransferase
Product (GenBank)hypothetical protein
Gene
Gene (GenBank)tmn16
EC number
Keyword
  • glyceroyl-CoA
Note
Note (GenBank)
  • 38% identity with the predicted enzyme involved in methoxymalonyl-ACP biosynthesis from Nostoc punctiforme (ZP_00110100.1)
Reference
ACC
PmId
[18404760] Analysis of the tetronomycin gene cluster: insights into the biosynthesis of a polyether tetronate antibiotic. (Chembiochem. , 2008)
[18046685] Glyceryl-S-acyl carrier protein as an intermediate in the biosynthesis of tetronate antibiotics. (Chembiochem. , 2008)
comment
[PMID: 18404760](2008)
Streptomyces sp. NRRL 11266におけるtetronomycin (TMN) gene clusterに関する文献。

tmn16(633 aa): phosphatase and glyceryl transferase

tmn16の変異株ではTMN生産が消失し、tmn16の遺伝子を相補することでTMN生産が回復することが示されている。また、Tmn16が1,3-bisphosphoglycerateから生産されるglyceryl-Tmn7 proteinを触媒する結果が得られている事(PMID: 18046685)が記されている。

---
[PMID: 18046685](2008)
上記と同じグループのtetronate生合成に関する報告。

珍しいtetronate ringのあるtetronomycin, chlorothricinの生合成clusterにはFkbH-like proteinが含まれる。そのtetronate生合成経路を明らかにするため、FkbH-like proteinとACPをHis-tag付きで精製し、これを用いてglyceryl-S-ACPの形成を質量分析で検出している。

使用されているのは、
・tetronomycin clusterのTmn16 and Tmn7a
・chlorothricin clusterのChlD2
・concanamycin clusterのCon4* and Con2*

FkbH-like protein Tmn16は、D-1,3-bisphosphoglycerateからACPであるTmn7a or ChlD2へ効率的にglyceryl部分を移動し、glyceryl-S-ACPを形成した。よってglyceryl-S-ACPはtetronate生合成の中間体であると考えられる。

また、Tmn16 and Tmn7aは知られた伸長unit(methoxymalonyl-ACP)生合成経路由来のconcanamycin genes Con4* and Con2*とは反応しなかった。
Related Reference
ACC
Q0R4L8
NITE
Chth_00360
PmId
[18586939] Cloning and characterization of the tetrocarcin A gene cluster from Micromonospora chalcea NRRL 11289 reveals a highly conserved strategy for tetronate biosynthesis in spirotetronate antibiotics. (J Bacteriol. , 2008)
comment
<ChlD1, Streptomyces antibioticus, BLAST 2; id=58%>

Micromonospora chalceaにおけるtetrocarcin A gene clusterに関する文献であるが、spirotetronate antibioticsに共通して保存されているtetronate biosynthesisについて調べており、その過程で、同じspirotetronate antibioticsであるchlorothricin gene cluster中の遺伝子chlD1-chlD4について実験を行っている。

chlD1とchlD2をそれぞれE. coliで発現させて精製し、in vitroで機能を調べている。
精製したChlD1をATP, Mg2+, D-3-PG, TCEP, PGKと共にインキュベートし、holo-ChlD2を加えた結果、glycerol-ChlD2に変換されていることをHPLCとMALDI-TOF MSを使った解析によって確認し、ChlD1によってglyceroyl groupがACPに導入され、AT activityとphosphatase activityの両方の活性が生じる事が示されている。

close this sectionSequence

selected fasta
>glyceroyl-ACP biosynthesis protein [hypothetical protein]
MSAAPAPPPTAPDPVAELHRSGSLVAEYPRLPALLRELGENERQRAGRLLSRLSPDEVLA
AHPGIPTVSVAVTGHGTVAGLVPPLTMELARHGMLLRPHVADFGGWLFDLADPASEVYAA
GTDLVVCLPAAGIVFDEVPRPWRPEDVERVLTEKVHLLGKLAATHGTSGSGTLVYTTMPL
PREFTSQLVDHRSRARLGAVWREGNARLLGLMDEHPGLVVLDLDPVLSGPAALAEPRLET
YAGTPFAAELTAAVAREVAHLARGRSGRAKKVLAVDLDNTLWGGVLGDDGPEGIEVADGR
TGRAFQRMQRVVKQLASRGVLVAAVSKNDLEPVREVLREHQEMTLREDDFVRVVANWAPK
HDNLRALAEDLNVGLDSFVFADDSPYECGLVASELPEVTVLHLDGDPALHAERLLADGWF
DVRDLTDDDVRRPERYREELVRKDFLDSFSSLDDYLRELDVRVELSAAAEADVPRVAQLT
QRTNQFNLTTRRLQQDEVASLAGSPGNMVLAIRCGDRFGDNGLVGAVFVRTDGPVWHVDN
FLLSCRVFARGIEQGCLAALLEHARAEGAEAVAARYVPSTKNGKVRDFYPRNGFDAHGQS
EDGTADFRHELLEIGAVPGHLDLTVRWEQEGTR
selected fasta
>glyceroyl-ACP biosynthesis protein [hypothetical protein]
GTGTCCGCTGCCCCCGCTCCCCCGCCCACCGCTCCGGATCCCGTCGCGGAGCTGCACCGG
TCCGGCAGCCTGGTCGCGGAGTACCCGAGACTCCCCGCGCTGCTCCGGGAGCTCGGCGAG
AACGAACGGCAGCGCGCCGGGCGGCTGCTGTCCCGCCTGTCCCCCGACGAGGTGCTCGCG
GCCCACCCCGGCATCCCGACGGTGTCCGTCGCGGTGACCGGGCACGGCACGGTCGCCGGC
CTCGTGCCGCCGCTCACCATGGAGCTGGCCCGGCACGGCATGCTGCTGCGCCCCCACGTC
GCGGACTTCGGCGGCTGGCTCTTCGACCTCGCGGACCCCGCCAGCGAGGTCTACGCCGCC
GGCACCGACCTCGTGGTGTGCCTGCCGGCCGCCGGGATCGTCTTCGACGAGGTGCCGCGC
CCGTGGCGGCCCGAGGACGTCGAGCGGGTGCTGACCGAGAAGGTGCACCTCCTCGGCAAG
CTCGCCGCCACCCACGGCACTTCGGGCTCCGGCACCCTCGTCTACACCACGATGCCGCTC
CCCCGGGAGTTCACCTCCCAGCTCGTGGACCACCGCTCCCGCGCCCGGCTCGGCGCCGTG
TGGCGCGAGGGCAACGCGCGGCTGCTCGGGCTCATGGACGAGCACCCCGGTCTCGTGGTC
CTCGATCTCGACCCGGTCCTCTCCGGGCCCGCGGCCCTCGCCGAGCCCCGCCTGGAGACC
TACGCCGGCACGCCCTTCGCCGCGGAGCTGACCGCCGCCGTCGCGCGCGAGGTCGCGCAC
CTCGCCCGCGGCCGGTCGGGGCGGGCGAAGAAGGTACTCGCGGTCGACCTGGACAACACC
CTGTGGGGCGGCGTGCTCGGCGACGACGGCCCGGAGGGCATCGAGGTCGCCGACGGCCGT
ACGGGGCGCGCGTTCCAGCGCATGCAGCGCGTGGTCAAGCAGCTCGCCTCGCGCGGGGTG
CTCGTGGCCGCCGTCAGCAAGAACGACCTGGAGCCCGTGCGCGAGGTGCTCCGCGAGCAC
CAGGAGATGACGCTGCGCGAGGACGACTTCGTCCGGGTGGTCGCCAACTGGGCGCCCAAG
CACGACAACCTGCGCGCGCTCGCCGAGGACCTCAACGTGGGCCTCGACTCGTTCGTCTTC
GCCGACGACAGCCCGTACGAGTGCGGCCTGGTGGCCAGCGAGCTGCCCGAGGTCACCGTG
CTCCACCTCGACGGCGACCCGGCGCTGCACGCCGAACGGCTGCTGGCCGACGGCTGGTTC
GACGTGCGCGACCTCACCGACGACGACGTCCGCCGCCCCGAGCGCTACCGCGAGGAGCTG
GTCCGCAAGGACTTCCTCGACTCCTTCTCGTCGCTCGACGACTACCTGCGGGAGCTGGAC
GTACGGGTCGAGCTGAGCGCCGCCGCGGAGGCCGACGTGCCGCGCGTGGCCCAGCTCACC
CAGCGCACCAACCAGTTCAACCTGACCACGCGGCGGCTCCAGCAGGACGAGGTCGCCTCC
CTGGCCGGCTCGCCGGGGAACATGGTGCTGGCCATCCGCTGCGGCGACCGCTTCGGGGAC
AACGGACTGGTCGGTGCGGTGTTCGTACGGACCGACGGGCCCGTGTGGCACGTCGACAAC
TTCCTGCTGAGCTGCCGGGTCTTCGCCCGCGGCATCGAGCAGGGCTGCCTCGCCGCGCTG
CTGGAGCACGCCCGGGCCGAGGGGGCCGAGGCCGTGGCGGCGCGGTACGTGCCGTCGACG
AAGAACGGCAAGGTCAGGGACTTCTATCCACGGAACGGCTTCGACGCCCACGGGCAGTCC
GAGGACGGGACGGCCGACTTCCGGCACGAGCTGCTGGAGATCGGCGCGGTGCCCGGCCAC
CTCGATCTGACGGTGCGCTGGGAGCAGGAGGGAACACGATGA

close this sectionFeature

BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
IPR000182 GNAT domain (Domain)
 [472-594]  4.5e-05 PF13673
PF13673   Acetyltransf_10
 [463-624]  PS51186
PS51186   GNAT
IPR010033 HAD-superfamily phosphatase, subfamily IIIC (Domain)
 [271-391]  1.99999999999999e-18 TIGR01681
TIGR01681   HAD-SF-IIIC
IPR010037 FkbH domain (Domain)
 [269-595]  6.40000000000004e-93 TIGR01686
TIGR01686   FkbH
IPR016181 Acyl-CoA N-acyltransferase (Domain)
 [462-601]  6.20000124972815e-10 SSF55729
SSF55729   Acyl_CoA_acyltransferase
 [463-602]  1.3e-09 G3DSA:3.40.630.30
G3DSA:3.40.630.30   Acyl_CoA_acyltransferase
IPR023214 HAD-like domain (Domain)
 [271-385]  2.1e-07 G3DSA:3.40.50.1000
G3DSA:3.40.50.1000   HAD-like_dom
 [269-428]  2.19999900980708e-11 SSF56784
SSF56784   HAD-like_dom
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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