A4092_00330 : CDS information

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Organism
StrainATCC 39727
Entry nameA40926
Contig
Start / Stop / Direction64,354 / 65,187 / + [in whole cluster]
64,354 / 65,187 / + [in contig]
Location64354..65187 [in whole cluster]
64354..65187 [in contig]
TypeCDS
Length834 bp (277 aa)
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Category3.2 modification methylation
Productputative SAM-dependent N-methyltransferase
Product (GenBank)putative methyltransferase
Gene
Gene (GenBank)dbv27
EC number2.1.1.-
Keyword
  • Hpg1
Note
Note (GenBank)
Reference
ACC
PmId
[12837387] The gene cluster for the biosynthesis of the glycopeptide antibiotic A40926 by nonomuraea species. (Chem Biol. , 2003)
[17873036] Phosphate-controlled regulator for the biosynthesis of the dalbavancin precursor A40926. (J Bacteriol. , 2007)
[25986904] Two Master Switch Regulators Trigger A40926 Biosynthesis in Nonomuraea sp. Strain ATCC 39727. (J Bacteriol. , 2015)
comment
[PMID: 12837387](2003)
Nonomuraea sp. ATCC39727由来A40926生合成gene clusterの同定論文。
A40926は半合成グリコペプチドdalbavancin (BI397 or MDL 62,397)の前駆体。

dbv ORF27: methyltransferase

配列解析のみ。cep methyltransferaseへの高い関係性から、末端p-hydroxyphenylglycine (HPG)残基のN-メチル化を触媒しそうだと述べられている。

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このORFの発現調節についての報告

[PMID: 17873036](2007)
RT-PCRとその産物のシークエンスで、dbv24-dbv28が同時転写されることを確認。
リン酸による遺伝子発現への影響がRT-PCRで調査されている。dbv25 と dbv28は影響を受けない。

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[PMID: 25986904](2015)
dbv clusterにあるregulatory genes dbv3, dbv4, dbv6についての調査。

dbv3の不活化株と過剰発現株からRNAを抽出してqRT-PCR解析した結果と既に確立されているオペロン構造から、Dbv3は6つのオペロン(dbv2-dbv1, dbv14-dbv8, dbv17-dbv15, dbv21-dbv20, dbv24-dbv28, dbv30-dbv35)と4つのmonocistronic transcription units dbv4, dbv29, dbv36, dbv37のpositive regulatorとして働くことが示された。
Related Reference
ACC
O52805
NITE
Chlor_00170
PmId
[19389626] Structure and function of the glycopeptide N-methyltransferase MtfA, a tool for the biosynthesis of modified glycopeptide antibiotics. (Chem Biol. , 2009)
comment
BLAST id58%
Amycolatopsis orientalis (Nocardia orientalis)
PCZA361.24
Orf16/MtfAに相当するentry.

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[PMIDなし]Expression and assay of an N-methyltransferase involved in the biosynthesis of a vancomycin group antibiotic. Chem. Commun., 2000, p103-104

MtfA(ORF16)をクローニング、発現、精製して測定に使用。
N-demethylvancomycin, そのaglycone, 環化されていない線状heptapeptide, (R)- and (S)-leucineを基質としてメチル化の程度を確認。基質を2つ用いた競合実験の結果もふまえ、chloroeremomycinの生合成経路におけるN-メチル化はheptapeptide骨格の酸化的架橋形成の後、ring 4 disaccharideの付加の前に起こると示唆される。

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[PMID: 19389626](2009)
MtfAは、vancomycin骨格を持つchloroeremomycinと違いteicoplanin骨格を持つdesulfo-A47934とteicoplaninを、SAM依存的様式でメチル化することができた。

さらにMtfAとMtfA複合体の結晶構造を解析している。
ACC
R4T056
PmId
[24884615] Complete genome sequence and comparative genomic analyses of the vancomycin-producing Amycolatopsis orientalis. (BMC Genomics. , 2014)
comment
BLAST id59%
Amycolatopsis orientalis HCCB10007_AORI_1490

vancomycinの大量産生に使用されているA. orientalis ATCC 43491由来工業用菌株HCCB10007の完全ゲノムシークエンス。そこからvcm cluster(AORI_1471-1505)を同定し、いくつかの遺伝子のmutantsを作製してin vivo機能を特徴づけている。

AORI_1490(vmt): Methyltransferase

mutant作成あり。vmt mutantはdemethylvancomycinを蓄積した。demethylvancomycinの生物活性はvancomycinに匹敵する。

demethylvancomycin or aglucovancomycinを基質として、異種性発現したAORI_1490はdimethylvancomycin or dimethylaglucovancomycinを生成した。2つのメチル基はLeuのN末にある。メチル化はin vitroでも抗菌活性に影響しなかった。

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selected fasta
>putative SAM-dependent N-methyltransferase [putative methyltransferase]
MISKAMHGPIRPARADTLLASVGERGILCDFYDENASEIFRDLEADAGGTEEAHGFAALV
RPESGAILELGAGTGRLTIPLLELGWEVTALELSTAMLTTLRTRLADAPADLRDRCTLVH
ADMTAFKLGERFGTAILSPSTIDLLDDADRPGLYSSVREHLRPGGRFLLGMANPDASGRQ
EPLERTQEFTGRSGRRYVLHAKVYPSEEIRDVTIHPADESADPFVICVNRFRVITPDQIA
RELEQAGFDVVARTPLPGVRNHELVLEAQWGSVEDAH
selected fasta
>putative SAM-dependent N-methyltransferase [putative methyltransferase]
ATGATAAGCAAAGCAATGCATGGACCGATTCGGCCCGCCCGCGCGGATACCCTGCTGGCC
TCGGTAGGCGAGCGAGGCATTCTGTGTGACTTTTACGACGAGAACGCCTCGGAAATCTTC
CGTGATTTGGAGGCGGACGCGGGCGGCACGGAAGAAGCCCACGGGTTCGCGGCGCTCGTC
CGCCCGGAGTCGGGGGCGATCCTGGAGCTCGGGGCCGGAACAGGCAGGCTGACGATTCCG
CTCCTGGAGCTCGGCTGGGAGGTGACCGCCCTCGAACTGTCGACCGCGATGCTCACCACC
CTGCGGACGCGGCTGGCGGACGCGCCGGCGGACCTCCGGGATCGGTGCACCCTCGTTCAC
GCGGACATGACCGCCTTCAAACTGGGAGAACGCTTCGGAACGGCGATTCTCAGCCCGTCC
ACGATCGACCTCCTGGACGATGCCGACAGACCAGGGCTGTACTCGTCGGTCCGTGAGCAT
CTGCGGCCCGGCGGGAGATTCCTGCTCGGCATGGCCAACCCCGACGCGTCCGGCAGGCAG
GAGCCGCTGGAGCGCACCCAGGAGTTCACGGGCAGGAGCGGCCGCCGATACGTGCTGCAC
GCCAAGGTCTACCCGTCGGAGGAGATCCGCGACGTGACCATTCATCCTGCGGATGAATCG
GCGGACCCCTTCGTCATCTGCGTCAATCGCTTCAGAGTCATCACCCCGGATCAGATAGCA
CGAGAGCTGGAGCAAGCCGGATTCGACGTGGTCGCGCGGACCCCACTGCCCGGGGTGCGT
AATCACGAACTGGTGCTGGAAGCGCAATGGGGCAGCGTGGAAGACGCGCATTAG

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BLASTP
Database:UniProtKB:2011_09
show BLAST table
InterPro
Database:interpro:38.0
No significant hit
SignalP No significant hit
TMHMM No significant hit
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