バイオテクノロジー

NBRC皮膚常在微生物カクテル

 皮膚マイクロバイオームは皮膚の健康の維持、アトピー性皮膚炎や乾癬(皮膚の炎症とともに角質層が厚く硬くなる病気)などの皮膚疾患に密接に関与していることが明らかにされています※1,2。また、ヒトの皮膚と住環境中の微生物群集には関連性があることから※3、皮膚マイクロバイオームを住環境の改善や法医学的な個人識別※4に活用するなどの産業応用が強く期待されています。
 しかしながら、皮膚マイクロバイオームは腸内などに比べて菌量がとても少なく、真菌(カビや酵母)の存在割合が高いため、サンプリング方法や処理方法の違いにより、マイクロバイオーム解析結果にばらつきが生じやすいことが課題でした。ラボ間や作業者の違いによる解析データのばらつきをなくし、再現性を確保するには、解析手法の妥当性評価や、試験あるいはラボ間の実験精度管理を行うことが必要です。
 NBRCは、皮膚マイクロバイオーム研究をサポートするために、一般社団法人日本マイクロバイオームコンソーシアム(JMBC)と国立研究開発法人産業技術総合研究所(産総研)モレキュラーバイオシステム研究部門と共同で「NBRC皮膚常在微生物カクテル」を開発し、2025年6月2日より提供を開始しました。

※1:Boxberger M. et al., Microbiome, 30;9(1):125 (2021) 
※2:中島沙恵子, 日本香粧品学会誌, 46(2):137–140 (2022) 
※3:Lax S. et al., Science, 345:1048-1052 (2014)  
※4:Fierer N. et al., PNAS, 107:6477-6481 (2010) 

NBRC皮膚常在微生物カクテルのラインナップ

 現在、提供しているNBRC皮膚常在微生物カクテルは以下の2種類です。

製品名
NBRC皮膚常在菌菌体カクテル
Cell-Mock-004
NBRC皮膚常在菌DNAカクテル
DNA-Mock-004
内容量 500 µL × 1本 30 µL × 1本
手数料
(税込・送料別)
¥19,140 ¥51,150
保存溶媒 15% glycerol in PBS(pH7.4) 10 mM Tris-HCl(pH8.5)
含有量  5x108  細胞/500 µL  1500 ng/30 µL
保存形態 凍結(-80℃)※5 凍結(-80℃)※5
データシート 241001SC
提供中のロット
250201SD
提供中のロット
 
  • ※5:入手後は-80℃のフリーザーで、凍結保存を行ってください。
  • ・手数料は送料を含みません(送料着払いにて送付します)。
  • ・振込手数料は依頼者様がご負担ください。

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NBRC皮膚常在微生物カクテルの特徴と含まれる微生物

本カクテルは、NBRCで取得した皮膚マイクロバイオームデータとOhら※6や柴垣ら※7の報告を参考に選定した、細菌14株と真菌4株から構成されています。
 
※6:Oh J. et al., Nature. 514:59–64 (2014) 
※7:Shibagaki N. et al., Scientific Reports. 7:10567 (2017)

NBRC皮膚常在微生物カクテルに含まれる14種類の細菌

 
学名
NBRC
番号
グラム染色
ゲノム
サイズ(Mbp)
GC含量(%)
16S
rRNA
コピー数
バイオ
セーフティ
レベル
Anaerococcus nagyae
陽性 1.9 30.7 1*
Corynebacterium pseudogenitalium 113660 陽性 2.5 59.5 4 1
Corynebacterium striatum 15291T 陽性 3.1 59.1 1*
Cutibacterium acnes subsp. acnes 113869 陽性 2.6 60.0 3 1*
Finegoldia magna 113804 陽性 1.7 32.1 4 1*
Staphylococcus capitis 115779 陽性 2.5 32.8 6 1*
Staphylococcus epidermidis 113846 陽性 2.5 32.1 6 1*
Staphylococcus hominis subsp. novobiosepticus 113928 陽性 2.3 31.8 6 1*
Streptococcus salivarius 13956 陽性 2.1 39.9 6 1*
Acinetobacter radioresistens 102413T 陰性 3.4 41.4 6 1*
Escherichia coli 3301 陰性 4.8 50.8 7 1
Moraxella osloensis 115781 陰性 2.9 43.3 4 1*
Pseudomonas putida 14164T 陰性 6.2 62.3 7 1*
Roseomonas mucosa 115778 陰性 4.9 70.5 5 1*

NBRC皮膚常在微生物カクテルに含まれる4種類の真菌

 
学名
NBRC
番号
ゲノム
サイズ(Mbp)
GC含量(%)
バイオ
セーフティ
レベル
Aspergillus brunneoviolaceus
36.1 50.8
Candida tropicalis
14.6 33.2
Trichophyton rubrum
22.1 48.3
Malassezia globosa
9.1 52.0

NBRC皮膚常在菌菌体カクテル (Cell-Mock-004)

 NBRC皮膚常在菌菌体カクテルは、ヒトの皮膚などに生息する18種類のNBRC株を純粋培養し、それぞれの細胞または胞子数が細菌:真菌=10:1になるように混合したものです。
 DNA抽出効率が異なるグラム陽性/陰性菌に加え、真菌の細胞あるいは胞子を混合しているため、DNA抽出における試薬の検討や一連の実験工程を通したプロトコルの検証などにおすすめです。

  • ※8:データシートでは各ロットにおけるデジタルPCRを用いた混合割合等の検証結果を公開しています。

NBRC皮膚常在菌DNAカクテル (DNA-Mock-004)

 NBRC皮膚常在菌DNAカクテルは、ヒトの皮膚などに生息する18種類のNBRC株の純粋培養物からゲノムDNAを抽出し、それぞれのゲノムDNAのコピー数が細菌:真菌=10:1になるよう混合したものです。
 サイズやGC含量、分類群が異なるゲノムを混合しているため、シーケンスライブラリーの調製方法やデータ解析方法の検証などにおすすめです。

  • データシート※8 250201SD
  • ※8:データシートでは各ロットにおけるデジタルPCRを用いた混合割合等の検証結果を公開しています。

NBRC皮膚常在微生物カクテル構成株のゲノム配列情報

 
学名 NBRC
番号
ゲノム情報
アクセッション番号
分離源
Anaerococcus nagyae 113824 AP031484 ヒトの皮膚(腋の下)
Corynebacterium pseudogenitalium 113660 AP031485 ヒトの皮膚
Corynebacterium striatum 15291T BJLD00000000 不明
Cutibacterium acnes subsp. acnes 113869 CP084017 ヒトの皮膚(鼻)
Finegoldia magna 113804 AP031486 ヒトの糞便
Staphylococcus capitis subsp. capitis 115779 AP031467- AP031471 ヒトの皮膚(顎)
Staphylococcus epidermidis 113846 CP084008-CP084011 ヒトの皮膚(鼻)
Staphylococcus hominis subsp. novobiosepticus 113928 AP031487 ヒトの皮膚(肘)
Streptococcus salivarius 13956 AP031488 不明
Acinetobacter radioresistens 102413T AP019740-AP019748 γ線滅菌された綿
Escherichia coli 3301 CP048439, CP048440 ヒトの糞便
Moraxella osloensis 115781 AP031472- AP031483 ヒトの皮膚(肘窩)
Pseudomonas putida 14164T AP013070 不明
Roseomonas mucosa 115778 AP031462- AP031466 ヒトの皮膚(胸)
Aspergillus brunneoviolaceus 4062 登録準備中 ヒトの皮膚(腕)
Candida tropicalis 1404 登録準備中 ヒトの皮膚(感染した手)
Trichophyton rubrum 9185 登録準備中 不明
Malassezia globosa 101597 登録準備中 ヒトの皮膚

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NBRC皮膚常在微生物カクテルの品質確認

 製造したNBRC皮膚常在微生物カクテルの品質確認は、JMBCから公開されている皮膚マイクロバイオームの推奨プロトコル※9に準じたDNA抽出方法と、独自のデジタルPCRの検出系により実施し、一定の品質基準を満たすものであることを確認しています。
NBRC皮膚常在微生物カクテルをデジタルPCRで品質確認した図です。
※9:https://jmbc.life/sop/index.html

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アプリケーション例

 NBRC皮膚常在微生物カクテルは、試料からのDNA 抽出方法、アンプリコンシーケンス解析に用いるプライマーの選定やライブラリー調製試薬等の評価をはじめとしたプロトコルの確認、作業者間の手技の確認や新規作業者のトレーニングなどにお使い頂けます。

NBRC皮膚常在微生物カクテルのアプリケーション例の図です。
 
【利用例】
 ●菌叢解析におけるコントロール
 ●試薬・キットの開発における疑似サンプル
 ●事業所・作業者ごとの精度管理用サンプル
 ●プロトコル(方法・試薬)の確認
 ●SOP(標準作業手順書)のバリデーション
 ●試薬・装置の開発
 ●模擬微生物叢
 ●作業者の教育訓練

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お問い合わせ

独立行政法人製品評価技術基盤機構 バイオテクノロジーセンター  バイオ技術評価・開発課(かずさ)
TEL:0438-20-5764
住所:〒292-0818 千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 地図
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